吸光度

分光光度法是一种通过测量一束光通过样品溶液时的光强度来测量一种物质吸收多少光的方法。其基本原理是，每种化合物都能吸收或透射一定波长范围内的光。这种测量方法也可以用来测量已知化学物质的量。分光光度法是化学、物理、生物化学、材料化学工程和临床应用领域最常用的定量分析方法之一。分光光度法广泛应用于化学、物理、生物、生物化学、材料与化学工程、临床应用、工业应用等各个领域的定量分析。
分光光度计是一种测量光子通过样品溶液后吸收的数量（光的强度）的仪器。分光光度计一般由两个装置组成；光谱仪和光度计，光谱仪是一种产生、分散、测量光的装置。光度计指示测量光强度的光电探测器。用分光光度计，已知化学物质的量（浓度）也可以通过测量探测到的光的强度来确定。根据光源的波长范围，可分为两种不同的类型：
紫外-可见分光光度计：采用紫外范围（185-400nm）和可见光范围（400-700nm）以上的电磁辐射光谱。
红外分光光度计：采用超过红光范围（700-15000nm）电测辐射光谱。
在可见分光光度法中，某种物质的吸收或透射可以通过观察到的颜色来确定。例如，溶液样本可以吸收所有可见范围内的光。（不传输任何可见波长的光）在理论上是黑的。另一方面，如果所有的可见波长都被传输，例如，溶液样品呈白色。如果溶液样品吸收红光（700nm），它会呈现绿色，因为绿色是红色的互补色。可见分光光度计，在实践中，使用一个棱镜来缩小一定范围的波长（过滤掉其他波长），这样特定的光束，通过一个解决方案Sample Beer-Lambert法（也称比尔定律）吸光度与浓度之间的线性关系的一个示例。因此，比尔定律只适用于存在线性关系的情况。