5-Brom-4-chlor-3-indoxylphosphat

Strukturformel
Allgemeines
Name	5-Brom-4-chlor-3-indoxylphosphat
Andere Namen	(5-Brom-4-chlor-1H-indol-3-yl)dihydrogenphosphat; BCIP; X-Phosphat; X-Phos;
Summenformel	C8H8BrClNO4P
Kurzbeschreibung	hellgrauer Feststoff (Dinatriumsalz)
Externe Identifikatoren/Datenbanken
PubChem	65409
ChemSpider	58873
Wikidata	Q238472
Eigenschaften
Molare Masse	326,47 g·mol−1
Löslichkeit	wenig in Wasser (20 mg·ml−1, Dinatriumsalz)
Sicherheitshinweise
GHS-Gefahrstoffkennzeichnung	keine GHS-Piktogramme
	keine GHS-Piktogramme
H- und P-Sätze	H: keine H-Sätze
	P: keine P-Sätze
	Soweit möglich und gebräuchlich, werden SI-Einheiten verwendet.; Wenn nicht anders vermerkt, gelten die angegebenen Daten bei Standardbedingungen (0 °C, 1000 hPa).

5-Brom-4-chlor-3-indoxylphosphat (BCIP), auch X-Phos, ist ein artifizielles, chromogenes Substrat für das Enzym Alkalische Phosphatase (AP).

Eigenschaften

Das Enzym Alkalische Phosphatase hydrolysiert Indolylphosphat zu 5-Brom-4-chlorindolyl und Phosphat. Das 5-Brom-4-chlorindolyl wird vom Sauerstoff der Luft zum tiefblauen Farbstoff 5,5′-Dibrom-4,4′-dichlorindigo oxidiert.

Enzymatische Spaltung von X-Phos (BCIP) mittels der Alkalischen Phosphatase (AP) führt zur Bildung von 5-Brom-4-chlor-indolyl (1). Dieses bildet nach Oxidation an der Luft und Dimerisierung den blauen Farbstoff 5,5′-Dibrom-4,4′-dichlor-indigo (2).

Da BCIP in vielen Lösungsmitteln schwer löslich ist, wird entweder das Di-Natrium-Salz^[2] (wasserlöslich) oder häufiger das p-Toluidin-Salz^[3] (löslich in DMF) verwendet.

Verwendung

In der Biochemie wird BCIP im Zuge einer Immunfärbung in Kombination mit NBT zur sensitiven Detektion des Enzyms Alkalische Phosphatase (AP) benutzt.^[4]^[5]

Einzelnachweise

↑ ^a ^b ^c Datenblatt 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate disodium salt bei Sigma-Aldrich, abgerufen am 19. Dezember 2018 (PDF).
↑ Externe Identifikatoren von bzw. Datenbank-Links zu Dinatrium-5-Brom-4-chlor-3-indoxylphosphat: CAS-Nr.: 102185-33-1, EG-Nr.: 600-286-2, ECHA-InfoCard: 100.106.217, PubChem: 6097197, ChemSpider: 2006838, Wikidata: Q72452877.
↑ Externe Identifikatoren von bzw. Datenbank-Links zu 5-Brom-4-chlor-3-indoxylphosphat-di-p-Toluidinsalz: CAS-Nr.: 6578-06-9, EG-Nr.: 229-506-1, ECHA-InfoCard: 100.026.824, PubChem: 68768006, ChemSpider: 73132, Wikidata: Q72452880.
↑ James McGadey: A tetrazolium method for non-specific alkaline phosphatase, in: Histochemie, 1970, 23, S. 180–184; PMID 5507043; doi:10.1007/BF00305851.
↑ David A. Knecht, Randall L. Dimond: Visualization of antigenic proteins on Western blots, in: Anal. Biochem., 1984, 136, S. 180–184; PMID 6201085; doi:10.1016/0003-2697(84)90321-X.

[Sigma-1] Datenblatt 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate disodium salt bei Sigma-Aldrich, abgerufen am 19. Dezember 2018 (PDF).

[2] Externe Identifikatoren von bzw. Datenbank-Links zu Dinatrium-5-Brom-4-chlor-3-indoxylphosphat: CAS-Nr.: 102185-33-1, EG-Nr.: 600-286-2, ECHA-InfoCard: 100.106.217, PubChem: 6097197, ChemSpider: 2006838, Wikidata: Q72452877.

[3] Externe Identifikatoren von bzw. Datenbank-Links zu 5-Brom-4-chlor-3-indoxylphosphat-di-p-Toluidinsalz: CAS-Nr.: 6578-06-9, EG-Nr.: 229-506-1, ECHA-InfoCard: 100.026.824, PubChem: 68768006, ChemSpider: 73132, Wikidata: Q72452880.

[4] James McGadey: A tetrazolium method for non-specific alkaline phosphatase, in: Histochemie, 1970, 23, S. 180–184; PMID 5507043; doi:10.1007/BF00305851.

[5] David A. Knecht, Randall L. Dimond: Visualization of antigenic proteins on Western blots, in: Anal. Biochem., 1984, 136, S. 180–184; PMID 6201085; doi:10.1016/0003-2697(84)90321-X.

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